國家“863計劃”現代農業技術領域通過攻關篩選並設計了基於轉化事情的通用核酸引物和探針,初步建立了轉基因農産品品係特異性的精準檢測技術體系。
通過查詢網上公用數據庫和轉基因産品申報材料,系統收集並分析了我國批准商業化的25種轉基因産品的信息資料。在此基礎上,分析了外源插入載體邊界序列的信息,根據邊界序列設計了一系列的特異性引物,利用TAIL-PCR和測序等手段,分離、克隆和鑒定轉基因産品的品係特異性序列。結合目前數據庫中公佈的部分轉基因産品品係特異性序列,成功獲得和收集我國商業化的19種轉基因産品的品係特異性序列,分別是1種轉基因大豆、8種轉基因玉米、1種轉基因番茄、7種轉基因油菜、2種轉基因棉花。
隨機設計了一系列的寡核苷酸鏈,分別對這些寡核苷酸鏈進行網上數據庫比對,選擇與已有數據庫序列同源性較低,尤其是與轉基因植物及其外源基因序列同源性低的寡核苷酸鏈作為通用人工序列(UT),並用來設計通用雙鏈熒光探針。通過仔細序列比對,選擇 了兩條寡核苷酸鏈作為UT序列以及通用熒光探針的序列。在選擇了合適的UT序列和雙鏈熒光探針後,設計了一系列的靶序列特異性引物,對通用熒光定量PCR進行了優化,建立了通用熒光定量PCR反應體系。